克隆山羊成纤维细胞IGF2-H19基因座甲基化分析

• 作者: 万永杰 任才芳 刘孜斐 王锋 邓明田
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 体细胞核移植 再克隆 IGF2-H19 DNA甲基化 山羊耳成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 2277-2285
• 页数: 9页
• 分类号: S827.2
• 字数: 5258字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2017.12.007

摘要

旨在研究山羊体细胞核移植对克隆后代成纤维细胞IGF2-H 19基因座甲基化的影响.以奶山羊耳成纤维细胞(GFC,对照组)和克隆山羊耳成纤维细胞(CFC,试验组)为试验材料,培养至第5代时,采用细胞计数法绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR分析基因的表达差异,亚硫酸氢盐测序(BSP)分析差异甲基化区域的甲基化水平.结果显示,GFC和CFC组细胞的生长曲线均呈典型“S”型,但CFC组细胞的凋亡率显著高于GFC组(P＜0.01);CFC组细胞中Dnmt1 (P＜0.01)、Dnmt3b(P＜0.01)、Tet1(P＜0.05)、Tet2(P＜0.05)、H19(P＜0.05)和IGF2(P＜0.01)基因表达水平均显著低于GFC组,而Tet3、Dnmt3a和IGF2R在2组间无显著性差异;CFC组细胞中IGF2两个差异甲基化区域(DMR1和DMR2)的甲基化水平均显著低于GFC组(74.1％ vs.57.8％,P＜0.01;76.8％ vs.40.0％,P＜0.01),但IGF2-H19印记基因控制区域甲基化水平显著高于GFC组(68.8％ vs.84.0％,P＜0.01).体细胞核移植通过影响Dnmt和Tet家族基因的表达引起IGF2-H19基因座甲基化的异常,导致基因印记紊乱,进而影响再克隆的效率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	万永杰	南京农业大学动物科技学院	8	13	2.0	2.0
2	王锋	南京农业大学动物科技学院	172	854	17.0	21.0
3	任才芳	南京农业大学动物科技学院	4	3	1.0	1.0
4	邓明田	南京农业大学动物科技学院	2	3	1.0	1.0
5	刘孜斐	南京农业大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0