脂滴包被蛋白5对高糖高脂诱导的小鼠心脏微血管内皮细胞凋亡的影响及机制

• 作者: 侯娟妮 冯健 李秀川 杜劲 杨怡 杨永健 裴海峰 陈莎
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 糖尿病 高脂 脂滴包被蛋白5 氧化应激
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1045-1050
• 页数: 6页
• 分类号: R543.7
• 字数: 4048字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2017.12.04

摘要

目的 探讨脂滴包被蛋白5(Plin5)对高糖高脂诱导的小鼠心脏微血管内皮细胞凋亡的影响及其机制.方法 将高糖培养基培养的小鼠心脏微血管内皮细胞(MCMECs)分别给予0、100、300、500μmol/L棕榈酸干预24h.为探索Plin5对高糖高脂诱导MCMECs损伤的影响及机制,在300μmol/L棕榈酸干预24h基础上利用siRNA转染敲低细胞的Plin5表达,将细胞分为对照组(仅给予转染试剂处理)、Scra siRNA组(给予转染试剂+非特异阴性siRNA处理)、Plin5siRNA组(给予转染试剂+Plin5特异性siRNA处理).为进一步验证Plin5在高糖高脂导致MCMECs损伤的具体机制,利用siRNA敲低Plin5表达,再将细胞分为Vehicle组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组,并给予相同条件的高脂干预.流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,qRT-PCR及Western blotting分别检测细胞Plin5 mRNA及蛋白表达,DHE染色及ELISA试剂盒检测细胞内活性氧(ROS)含量.结果 MCMECs凋亡率随着棕榈酸浓度的升高而增加(P＜0.05).与0μmol/L棕榈酸相比,300μmol/L棕榈酸干预后细胞内ROS含量明显增加,Plin5表达也明显升高(P＜0.05).在300tμmol/L棕榈酸作用下,与对照组及Scra siRNA组相比,PlinS siRNA组细胞内ROS含量及凋亡率明显增加(P＜0.05).与Vehicle组比较,NAC组细胞ROS水平及细胞凋亡率均明显降低(P＜0.05).结论 Plin5可通过抑制氧化应激反应减少高糖高脂诱导的小鼠心脏微血管内皮细胞凋亡.