优降宁对CYP3A4/3A7基因启动子和增强子区组蛋白甲基化修饰及其转录的影响

• 作者: 何航 张莉蓉 李世刚 王沛 阚全程 陈钰龙
• 来源期刊: 药学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 个体发育 细胞色素P450 3A4 表观遗传 组蛋白甲基化 核受体 优降宁
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 药理学
• 页码范围: 91-98
• 页数: 8页
• 分类号: R968
• 语种: 中文
• DOI: 10.16438/j.0513-4870.2016-0767

摘要

观察优降宁(pargyline)对细胞色素P450 3A (cytochrome P450 3A,CYP3A)亚型CYP3A4/3A7启动子及增强子区组蛋白甲基化修饰及其基因转录的影响.原代分离培养人胎肝细胞,分为空白对照组、溶媒组、优降宁低、中、高(0.6、1.2、2.4 mmol·L-1)浓度组,HepG2细胞用0.03、0.3、3 mmol·L-1优降宁处理48 h,观察组蛋白甲基化修饰对CYP3A4/3A7基因表达的影响;3 mmol·L-1优降宁处理组与对照组的HepG2细胞进行染色质免疫共沉淀,选取特异CYP3A4/3A7启动子、增强子区位点设计引物进行实时定量PCR,H3K4me2富集以input百分比表示观察富集的改变.结果表明,优降宁能促进人原代胎肝细胞、HepG2细胞增殖生长,与溶媒对照组相比,优降宁(1.2、2.4 mmol·L-1)显著升高人原代胎肝细胞CYP3A7表达水平,且优降宁(3 mmol·L-1)显著升高HepG2细胞CYP3A4/3A7表达水平(P＜ 0.001);CYP3A4近端启动子区(-362～+53)和增强子区(-7 836～-6 093)的肝细胞核因子4A (hepatocyte nuclear factors 4A,HNF4A)结合位点及CYP3A7启动子区(-163～+103)和增强子区(-4 054～-3 421,-6 265～-6 247)的糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合位点与对照组相比,处理组均表现为H3K4me2高度修饰(P＜0.01,P＜0.001).提示优降宁诱导CYP3A4/3A7启动子及增强子区HNF4A、GR结合位点H3K4me2高度富集激活CYP3A4/3A7基因转录.