MALDI-TOF质谱准内标法及其用于rhTPO复杂糖一致性研究

• 作者: 侯利平 刘悦玫 孟晓光 杨梅 魏开华
• 来源期刊: 分析测试学报
• 学科: 化学
• 关键词: 重组人血小板生成素(rhTPO) 基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 准内标法 糖含量 糖化
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1458-1463
• 页数: 6页
• 分类号: O657.63
• 字数: 4560字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4957.2017.12.007

摘要

采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)准内标法准确测定重组人血小板生成素(rhTPO)仿制药和原研药中4类糖修饰的相对含量,并进行样本间和批间一致性比较.结合多种切糖酶逐步切除rhTPO的N-糖、唾液酸和O-糖;以牛血清白蛋白(BSA)为标准品,与样本非混合点靶;采用MALDI-TOF质谱准内标法检测,分别获得各样本完整含糖分子量及不同层次切糖后分子量;通过分子量差值计算4类糖修饰的相对含量;最后比较仿制药与原研药样本间和批间一致性.以BSA多电荷峰对rhTPO切糖前后的MALDI-TOF质谱测定值进行准内标法校正,BSA多电荷峰之间相对标准偏差(RSD)均≤0.075％,批间RSD为0.001％ ～0.004％,方法误差均＜0.01％.rhTPO仿制药N-糖、O-糖唾液酸、O-糖和糖化糖的相对含量分别约为24.6％、2.9％、9.0％和5.1％,批间一致性良好,且总糖含量与文献值一致;rhTPO原研药N-糖、O-糖唾液酸、O-糖和糖化糖的相对含量分别约为25.6％、2.9％、7.9％和3.5％,总糖含量较文献值偏低.与rhTPO原研药相比,仿制药糖基化糖相对含量基本一致,糖化糖含量有差异.rhTPO糖化糖研究未见文献报道,其差异是不同厂家rhTPO之间差异的重要因素,主要由发酵工艺差异导致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘悦玫	安徽医科大学研究生院	1	4	1.0	1.0
5	侯利平		1	4	1.0	1.0
6	杨梅		1	4	1.0	1.0
7	孟晓光		2	4	1.0	2.0
8	魏开华	安徽医科大学研究生院	1	4	1.0	1.0