细胞周期蛋白依赖性激酶7基因沉默或敲除抑制卵巢癌细胞增殖及其机制探讨

• 作者: 庄光磊 彭慧昕 高维强
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢肿瘤 细胞增殖 基因沉默 基因敲除技术 细胞周期蛋白质依赖性激酶类
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1119-1127
• 页数: 9页
• 分类号: R737.31
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2017.11.285

摘要

目的:探讨细胞周期蛋白依赖性激酶7 (cyclin-dependent kinase 7,CDK7)对卵巢癌细胞增殖的作用.方法:应用特异性siRNA转染法沉默卵巢癌OVCA433、TOV-112D和IGROV1细胞中CDK7基因表达后,采用CCK-8法检测细胞增殖能力.应用成簇的规律间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeat,CRISPR)及其相关核酸内切酶9(CRISPR-associated endonuclease 9,Cas9)基因编辑系统敲除卵巢癌HEY、OVCA420、OVCA433和IGROV1细胞中的CDK7基因后,采用克隆形成实验检测细胞克隆形成能力.用CDK7抑制剂THZ1处理卵巢癌TOV-112D、IGROV1、OVCA433、OVCAR8、OV90、SKOV3和COV413B细胞后,采用CCK-8法和克隆形成实验检测TOV-112D、IGROV1、OVCA433、OVCAR8和OV90细胞增殖和克隆形成能力,蛋白质印迹法检测IGROV1、OVCA433、SKOV3和COV413B细胞中CDK7蛋白表达水平和RNA聚合酶Ⅱ磷酸化水平.结果:沉默或敲除CDK7基因后,卵巢癌细胞的增殖和克隆形成能力均明显减弱(P值均＜ 0.05).THZ1处理可抑制卵巢癌细胞的增殖和克隆形成,并下调CDK7蛋白表达和RNA聚合酶Ⅱ磷酸化(P值均＜0.05).结论:CDK7可能通过调控RNA聚合酶Ⅱ磷酸化,促进卵巢癌细胞的增殖.