变异链球菌低pH感应系统的构建

• 作者: 周学东 康迪 李雨庆
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 变异链球菌 唾液链球菌 绿色荧光蛋白 尿素酶 启动子
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 239-244
• 页数: 6页
• 分类号: R780.2
• 字数: 5064字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7518/hxkq.2017.03.003

摘要

目的 构建变异链球菌低pH感应系统,原位可视地检测其所处环境的pH.方法 通过聚合酶链反应(PCR)和基因重组技术,克隆得到唾液链球菌57.I的ureⅠ基因启动子片段(pureⅠ)及绿色荧光蛋白(GFP)的编码基因gfp,经过酶切后将两个基因片段连接融合,然后再经双酶切将融合片段与大肠杆菌-变异链球菌穿梭载体pDL278连接,构建出重组质粒pDL278-pureⅠ-gfp.将重组质粒转化到变异链球菌UA159中,使用荧光显微镜观察其在不同pH条件和不同处理时间的单位面积荧光强度.结果目的基因pureⅠ和gfp扩增片段大小分别为450 bp和717 bp,与预期大小相符.构建的重组质粒pDL278-pureⅠ-gfp测序结果与数据库比对完全一致.重组变异链球菌低pH报告菌株PCR扩增片段与预期结果相符.在一定范围内,变异链球菌低pH感应系统单位面积荧光强度随pH值的降低和处理时间的延长而增强.结论 本研究成功构建了变异链球菌低pH感应系统,同时验证了唾液链球菌酸诱导启动子pureⅠ能在变异链球菌中正常发挥功能,为今后研究菌斑生物膜中原位pH的动态变化提供了新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周学东		6	21	3.0	4.0
2	康迪		1	0	0.0	0.0
3	李雨庆		1	0	0.0	0.0