向日葵黄萎病病原菌轮枝菌的多重DPO-PCR检测方法

• 作者: 乾义柯 张娜 易建平 陆平 魏霜
• 来源期刊: 植物保护学报
• 关键词: 向日葵黄萎病 黑白轮枝菌 大丽轮枝菌 多重DPO-PCR
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 115-120
• 语种: 中文
• DOI: 10.13802/j.cnki.zwbhxb.2017.2015120

摘要

为建立可同时快速检测引起向日葵黄萎病害的2种检疫性病原菌大丽轮枝菌Verticillium dahliae Kleb.和黑白轮枝菌V.albo-atrum Reinke et Berthold的方法,根据2种病原菌的β-tubulin基因分别设计特异性DPO引物,建立多重DPO-PCR检测方法,并对其特异性和灵敏度进行评价.结果表明,所设计的DPO引物特异性强,仅大丽轮枝菌和黑白轮枝菌可分别扩增出225 bp与151 bp的特异性条带,其它向日葵病害的7种病原菌及阴性对照均无目的条带;反应体系中引物终浓度为0.2 μmol/L、退火温度为60℃时,30个扩增循环的检测灵敏度均可达0.05 ng菌丝DNA量;在45 ～ 65℃退火温度范围内均可高效扩增靶基因片段,表明该方法退火温度范围宽.所建立的检测方法能够准确、高效地检测引起向日葵黄萎病的大丽轮枝菌和黑白轮枝菌,可用于向日葵种子带菌筛查及田间病害诊断检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	易建平		66	433	12.0	17.0
2	魏霜		35	81	5.0	5.0