RNA干扰技术抑制洋桔梗ACC合酶基因的表达

• 作者: 孙晶 廖静 张倩 陈崇顺
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 洋桔梗 ACC合酶 RNA干扰 花期
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·生理生化
• 页码范围: 267-272
• 页数: 6页
• 分类号: S681.9
• 字数: 4948字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2017.02.005

摘要

为了延长洋桔梗的花期,本研究通过农杆菌介导法,以ACC合酶(ACS)基因干扰表达载体,对Double Mariachi Pink洋桔梗(Eustoma grandiflorum)的叶片外植体进行了转化.经过再生芽的筛选增殖培养,在含有卡那霉素Km(15 mg/L)再生根筛选培养基中得到了46株抗性苗,其中11株经GFP基因PCR鉴定为阳性.经进一步的GFP基因RT-PCR鉴定,3株表达为阳性,并且其中2株经GFP荧光检测呈阳性.提取荧光阳性植株RNA,逆转录后,进行了ACS荧光定量PCR.结果表明,与未转基因对照植株相比,转基因植株ACS的相对表达量平均下降了63.17%.花期统计结果表明,ACS干扰表达载体转化的洋桔梗植株花期比未转基因植株对照延长了17 d.