光肩星天牛气味结合蛋白AglaOBP1的克隆、表达及结合特性

• 作者: 姚付龙 尚天翠 李广伟 陈秀琳
• 来源期刊: 环境昆虫学报
• 学科: 农学
• 关键词: 光肩星天牛 气味结合蛋白 嗅觉 荧光竞争结合实验 挥发物
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 919-929
• 页数: 11页
• 分类号: Q966|S433.5
• 字数: 8722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0858.2017.04.25

摘要

利用RT-PCR技术克隆了光肩星天牛Anoplophora glabripennis Motschulsky气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)基因AglaOBP1(GenBank登录号:KX660670),AglaOBP1的开放阅读框长435 bp,编码144个氨基酸,其中N端有21个氨基酸组成的信号肽序列,成熟蛋白序列具有4个保守的半胱氨酸残基,AglaOPB1属于Minus-C OBP亚家族基因.AglaOBP1主要在成虫触角中表达,且雌虫触角中的表达量显著高于雄虫触角.重组蛋白AglaOBP1与34种气味配体的竞争结合实验表明,AglaOBP1具有广泛的结合谱,能与五角枫挥发物中的醇类、醛类、萜烯类和酮类物质结合,其中与顺-3-己烯-1-醇、顺-2-己烯-1-醇、1-己醇、反-2-己烯醛、反-2-癸烯醛、β-石竹烯、(+)-桧烯、α-蒎烯、1-(2,3-二甲基苯基)-乙酮的结合能力较强,结合常数分别为5.88、8.33、12.29、12.55、11.90、7.47、9.07、10.29和13.12 μM.此外,配体的官能团、碳链长度、空间构型也影响AglaOBP1对气味分子的结合.AglaOBP1基因在成虫触角中高丰度表达,其重组蛋白能够与五角枫挥发物的多种组分结合,表明AglaOBP1在成虫寄主定位选择中起重要作用.