沙葱萤叶甲热激蛋白基因GdHsp70的克隆与表达模式分析

• 作者: 单艳敏 周晓榕 庞保平 张玉 谭瑶 霍志家
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 沙葱萤叶甲 热激蛋白70 基因克隆 表达分析 温度胁迫
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 865-875
• 页数: 11页
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2017.08.003

摘要

[目的]本研究旨在克隆沙葱萤叶甲Galeruca daurica热激蛋白Hsp70基因,并对其进行序列和表达模式分析,探讨该基因在沙葱萤叶甲生长发育及响应温度胁迫方面的作用.[方法]采用RT-PCR和RACE技术从沙葱萤叶甲2龄幼虫中克隆Hsp70基因,并进行生物信息学分析;用WoLF PSORT在线软件进行亚细胞定位预测;采用实时荧光定量PCR检测该基因在沙葱萤叶甲成虫不同组织(头、胸和腹)中、不同发育阶段(卵、1-3龄幼虫、蛹、雌雄成虫)、不同温度(-14,-10,-5,0,5,10,15,20,25和30℃)处理1h的2龄幼虫及0℃下分别处理0 min,15 min,30min,1h,1.5h,2h和3h时卵中的相对表达量.[结果]克隆获得一个沙葱萤叶甲Hsp70基因并命名为GdHsp70(GenBank登录号:KY460462),该基因全长2 340 bp,开放阅读框(ORF)1 899 bp,编码632个氨基酸,预测蛋白质分子量为70.12 kD,等电点(pI)为4.79,无跨膜区,无信号肽.蛋白质亚细胞定位预测该蛋白主要位于细胞质内.蛋白质结构域分析表明,GdHsp70有3个功能保守区.同源比对与系统进化分析表明,GdHsp70与分类学关系上较为接近的昆虫的同源蛋白间有较高的相似度.组织特异性和不同发育阶段表达分析表明,GdHsp70在沙葱萤叶甲成虫胸部和卵期表达量最高;高温和低温胁迫均能诱导沙葱萤叶甲2龄幼虫体内GdHsp70的表达,其中-10℃处理1h表达量最高;0℃低温处理卵15 min至3h后均能诱导GdHsp70不同程度的表达上调,其中处理1h上调幅度最大.[结论]沙葱萤叶甲GdHsp70与该虫的生长发育相关,并对高低温胁迫的响应有重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张玉	内蒙古农业大学草原昆虫研究中心	67	166	7.0	8.0
2	庞保平	内蒙古农业大学草原昆虫研究中心	104	1186	20.0	27.0
3	周晓榕	内蒙古农业大学草原昆虫研究中心	59	674	16.0	23.0
4	单艳敏		9	64	4.0	8.0
5	谭瑶	内蒙古农业大学草原昆虫研究中心	13	35	4.0	5.0
6	霍志家	内蒙古农业大学草原昆虫研究中心	3	4	1.0	2.0