β-arrestin 2 shRNA慢病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 任涛 涂秋杰
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: β-arrestin 2 shRNA 慢病毒 非小细胞肺癌
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 33-36,40
• 页数: 5页
• 分类号: R563.9
• 字数: 2672字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16118/j.1008-0392.2017.06.007

摘要

目的 构建β-arrestin 2的shRNA慢病毒载体,获得稳定低表达β-arrestin2的人非小细胞肺癌A549细胞并验证敲低效果.方法 查询4对可信的β-arrestin2敲低序列,将载体质粒pSicoR-GFP线性化,构建目的质粒,转化感受态细胞,对长出的克隆应用菌落PCR鉴定,再对阳性结果进行测序和比对分析.重组病毒质粒与另外三种辅助包装原件载体质粒通过Lipofectamine 2000共转染293T细胞,培养48 h后,收集细胞培养上清液,导入人非小细胞肺癌细胞A549中,用qRT-PCR检测转染效率.结果 成功构建β-arrestin2的shRNA慢病毒载体质粒,测序比对结果一致.qRT-PCR检测发现一组β-arrestin2的mRNA表达只有对照组的56％.结论 成功构建β-arrestin2的shRNA慢病毒载体,并验证其在人非小细胞肺癌细胞A549中敲低效果显著.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任涛	同济大学附属东方医院呼吸内科	49	246	9.0	13.0
2	涂秋杰	同济大学附属东方医院呼吸内科	1	0	0.0	0.0