siRNA沉默EPAS1基因对低氧条件下大鼠PASMCs增殖的影响

• 作者: 嘎琴 孙莉 杨全余 靳国恩
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: EPAS1基因沉默 低氧 肺动脉平滑肌细胞 增殖
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 320-325
• 页数: 6页
• 分类号: R332
• 字数: 4614字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2017.04.09

摘要

目的 探讨应用siRNA技术沉默EPAS1 (HIF-2α)基因表达对低氧条件下培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响.方法 原代培养大鼠PASMCs共采用免疫荧光法进行鉴定.构建特异性EPAS1 siRNA脂质体,转染PASMCs,从3个干扰靶点中选取效果最好的靶点进行干扰;在常氧(37℃、5％CO2、20％O2)和低氧(37℃、5％CO2、2％O2)条件下分别培养24、48、72h,采用Western blotting检测PASMCs中EPAS1、VEGF蛋白的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖情况.结果 成功分离培养原代大鼠PASMCs并经免疫荧光鉴定证实.将特异性的EPAS1 siRNA脂质体转染到PASMCs,选择干扰效果最好的靶点2进行干扰.与常氧条件比较,低氧条件下PASMCs中VEGF蛋白的表达及细胞增殖水平均明显升高;沉默EPAS1后,无论低氧还是常氧条件下,PASMCs中VEGF蛋白的表达及细胞增殖水平均明显降低.结论 EPAS1基因参与了低氧条件下大鼠PASMCs增殖的调控,其调节可能是通过VEGF介导完成的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙莉	810001西宁 青海大学附属医院科研管理部	1	2	1.0	1.0