梨炭疽病菌原生质体遗传转化体系的建立及GFP标记菌株的获得

• 作者: 乔俊卿 刘永锋 刘邮洲 常有宏 杜艳 蔺经
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 梨炭疽病菌 遗传转化 原生质体 GFP标记菌株
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 295-300
• 页数: 6页
• 分类号: S661.2
• 字数: 5657字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2017.02.009

摘要

为建立梨炭疽病菌的原生质体遗传转化体系,以梨炭疽病菌菌株II-17为供试菌株,研究了菌龄、酶解液组合及酶解时间等对梨炭疽病菌原生质体制备的影响.结果表明,制备梨炭疽病菌原生质体的适宜条件为:CM液体培养基培养分生孢子24 h后,再转接到新的CM液体培养基中培养24 h,获得新鲜的菌丝;最适酶解液组合为9.0 mg/ml裂解酶+1.0 mg/ml崩溃酶+1.0 mg/ml蜗牛酶;酶解时间为2.5~3.0 h时酶解效率最高.对获得的转化子进行PCR鉴定和荧光观察,结果表明,GFP标记基因已成功整合到梨炭疽病菌的基因组中,转化子发出强烈的绿色荧光且遗传性稳定.致病性测定结果表明,转化子致病性与野生型菌株无明显差别,成功获得了梨炭疽病菌的GFP标记菌株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔺经	江苏省农业科学院园艺研究所	149	1489	20.0	30.0
2	常有宏	江苏省农业科学院园艺研究所	130	1275	19.0	28.0
3	刘永锋	江苏省农业科学院植物保护研究所	116	2469	28.0	44.0
4	刘邮洲	江苏省农业科学院植物保护研究所	104	1730	22.0	36.0
5	乔俊卿	江苏省农业科学院植物保护研究所	38	380	11.0	18.0
6	杜艳	江苏省农业科学院植物保护研究所	14	58	4.0	6.0