鲁氏耶尔森菌qPCR快速检测方法的建立和应用

• 作者: 卢彤岩 张枭 曹永生 李绍戊 王荻
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鲁氏耶尔森菌 rupA基因 实时荧光定量PCR 肠炎红嘴病 鲑科 虹鳟
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1254-1260
• 页数: 7页
• 分类号: S94
• 字数: 4838字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2017.17001

摘要

鲁氏耶尔森菌(Yersinia ruckeri)是导致虹鳟(Oncorhynchus mykiss)肠炎红嘴病的病原.本研究以鲁氏耶尔森菌毒力因子rupA基因为靶标设计1对特异性引物,以含有rupA基因部分序列的重组质粒为标准品构建标准曲线,优化建立检测鲁氏耶尔森菌的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法,并对腹腔注射鲁氏耶尔森菌菌悬液的虹鳟肝、肾、脾、血液样品进行检测.结果显示,设计的引物具有良好的种间特异性,标准曲线线性方程为y=-3.3766x+40.012(R2=0.9958);最低检测限为57 copy/μL,较常规PCR的灵敏度高出约100倍.应用检测结果表明,本方法可准确检测被鲁氏耶尔森菌感染的虹鳟样品.研究表明,所建立的qPCR方法具有特异、灵敏、快速、定量的优点,可用于快速诊断虹鳟肠炎红嘴病早期病症及定量检测鲁氏耶尔森菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢彤岩	中国水产科学研究院黑龙江水产研究所	150	1526	19.0	31.0
2	李绍戊	中国水产科学研究院黑龙江水产研究所	54	411	10.0	16.0
3	王荻	中国水产科学研究院黑龙江水产研究所	100	647	13.0	18.0
4	曹永生	中国水产科学研究院黑龙江水产研究所	14	29	3.0	4.0
5	张枭	中国水产科学研究院黑龙江水产研究所	2	2	1.0	1.0