多倍体西瓜染色体制片技术改良及其核型分析

• 作者: 何毅 李天艳 李文信 李桂芬 柳唐镜 樊学军 洪日新 覃斯华 韦正光 黄金艳
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 多倍体西瓜 染色体制片 荧光染色 核型分析
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 园艺·园林·林业
• 页码范围: 663-668
• 页数: 6页
• 分类号: S651
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2017.04.016

摘要

[目的]改良多倍体西瓜染色体标本制片技术,比较多倍体西瓜常规核型分析与荧光核型分析结果,为西瓜细胞遗传学研究及辅助构建西瓜物理遗传图谱提供参考依据.[方法]以多倍体西瓜为材料,以传统染色体制片方法去壁—低渗火焰干燥法为基础,去掉其前低渗和后低渗两个步骤,合并其再固定与火焰涂片两个步骤,用吉姆萨染色剂和荧光染料DAPI分别对多倍体西瓜染色体进行常规染色和荧光染色,并进行核型分析.[结果]使用改良型酶解去壁火焰干燥法进行多倍体西瓜染色体制片,比传统去壁—低渗火焰干燥法简化了用KCl溶液前低渗、后低渗及用卡诺固定液再固定3个步骤,可缩短制片时间1.0~2.0 h,提高制片效率,获得的染色体样本数目齐全、分散良好、形态清晰.用DAPI染色比用吉姆萨染色更容易检测到细胞中期分裂相,每张玻片可缩短检测时间0.5~1.5 h;染色体的着丝点、长臂及短臂形态更清晰.[结论]采用改良染色体制片方法可提高多倍体西瓜染色体的制片效率,对该制片进行荧光核型分析比常规核型分析更准确,效率更高.