单纯疱疹病毒Ⅱ型CTCF结合位点抑制启动子功能

• 作者: 何丹 杨慧兰
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2) 潜伏复发机制 CTCF 基因表达调控
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 人类病毒研究论著
• 页码范围: 558-564
• 页数: 7页
• 分类号: R373.1+1
• 语种: 中文

摘要

为了找到CTCF在单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)中的结合位点,并探讨其基因表达调控作用.对比HSV-1与HSV-2全基因组中CTCF结合序列区别;生物信息学分析HSV-2全基因组;Jaspar在线预测CTCF结合位点;依据CTCF结合的序列特点预测结合位置;PCR扩增预测位点并插入pGL3-promoter构建重组载体;重组载体转染人胚胎肾细胞(293T)双荧光检测验证预测位点转录调控效应.预测得到三个CTCF结合位点分别位于潜伏相关转录本(LAT)上游(CTUL)、下游(CTa'm)及内含子(CTRL)位置;扩增目的片段并构建重组载体,双酶切及测序验证成功;双荧光检测显示LAT内含子(pGL3-promoter-CTRL)及下游(pGL3-promoter-CTa' m)结合位点重组载体转染组与pGL3-promoter载体转染组相比,荧光强度明显减弱,差异有统计学意(P＜0.001),但与pGL3-basic组相比,并没有完全沉默荧光霉素的表达;上游结合位点重组载体(pGL3-promoter-CTUL)转染组与pGL3-promoter 相比无明显差异(P＞0.05).HSV-2 LAT序列内含子及下游序列上存在CTCF结合位点,具有减弱基因启动子功能的效应,可能在HSV-2维持潜伏中发挥作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何丹		6	31	2.0	5.0
2	杨慧兰		2	0	0.0	0.0