骨髓间充质干细胞来源的外泌体静脉移植对脊髓损伤的修复作用

• 作者: 王琳 裴双 贾延劼 陈雪梅
• 来源期刊: 中国脊柱脊髓杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 外泌体 脊髓损伤 骨髓间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1119-1127
• 页数: 9页
• 分类号: R338.2
• 字数: 6564字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-406X.2017.12.10

摘要

目的:初步探讨大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells.BMSCs)来源的外泌体静脉移植对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的修复作用.方法:全骨髓培养法培养大鼠BMSCs.收集P2代细胞上清,ExoQuick Precipitation提取法分离并纯化外泌体,通过透射电镜观察鉴定外泌体形态,采用Western blot鉴定外泌体表面标志蛋白CD9、CD63.通过脊髓法建立大鼠SCI模型,造模1h后尾静脉给予外泌体移植500μl(外泌体蛋白浓度为200μg/ml),采用随机数字表法分将30只大鼠为三个组:假手术组、对照组(SCI+磷酸盐溶液)、外泌体组(SCI+外泌体),均采用BBB评分、斜板实验于造模后1、3、7、14、21、28d评价大鼠运动功能恢复情况,并于术后28d处死取材,采用苏木精-伊红(HE)染色、髓鞘(luxol fast blue,LFB)染色观察各组脊髓组织形态学改变,尼氏(Nissl)染色观察神经元存活数目.结果:透射电镜下可见大量直径40～100nm的立体圆形或茶托形的小囊泡结构,外周可见完整的类脂质膜性结构,内含低电子密度物质.Western Blot显示CD9、CD63蛋白表达阳性.造模后假手术组各时间点的BBB评分和斜板评分均正常,对照组和外泌体组BBB评分和斜板评分均低于假手术组(P.＜0.05),造模后7、14、21、28d外泌体组BBB评分分别为6.30±0.95、12.70±1.57、16.60±1.08、17.00±0.67分,均高于同时间点对照组的2.50±1.08、6.90±0.99、10.50±0.85、12.50±1.08分(P＜0.05).造模后7、14、21、28d外泌体组斜板评分分别为43.00±3.50、55.50±4.38、62.50±2.64、65.00±3.33分,均高于同时间点对照组的34.00±3.16、43.00±4.22、49.00±4.59、52.50±4.25分(P＜0.05).造模后28d,假手术组脊髓组织HE染色、LFB染色、Nissl染色正常,对照组脊髓空洞形成、髓鞘排列紊乱、神经元数目减少,外泌体组与对照组比较脊髓组织损伤程度减轻,存活神经元数目增多(P＜0.05).结论:MSCs来源的外泌体可减轻脊髓损伤后的病理变化,改善运动功能,促进脊髓损伤后神经功能修复.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾延劼		115	486	11.0	15.0
2	王琳		102	316	9.0	13.0
3	陈雪梅		48	153	6.0	9.0
4	裴双		5	14	2.0	3.0