棉花保卫细胞原生质体的有效分离与活性鉴定

• 作者: 孔培涛 张骁 朱金东 王雪娇 赵翔
• 来源期刊: 植物生理学报
• 关键词: 棉花 保卫细胞 原生质体 K+电流
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 729-735
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

模式植物拟南芥保卫细胞原生质体的分离技术已得到应用,然而如何有效分离和纯化棉花保卫细胞原生质体,已成为棉花气孔运动调控机理研究的限制因素.本文探索了一种棉花保卫细胞原生质体分离和活性鉴定的方法.我们选取生长2~3周的棉花幼叶下表皮,利用1.3%纤维素酶和0.03%果胶酶进行一步酶解约1.5 h,先低速15×g离心5 min,再高速105×g离心10 min分离,所获得保卫细胞原生质体的数量和纯度较好.利用膜片钳技术检测所分离得保卫细胞原生质体活性,发现记录的全细胞K+电流稳定性好,光处理明显增加K+的内流,说明所检测原生质体的细胞质膜及其生理活性保持较好.该棉花保卫细胞原生质体分离和鉴定方法的建立,可为研究棉花保卫细胞膜通透性、离子转运以及气孔运动机理提供基础.