二甲基甲酰胺诱导H9c2心肌细胞凋亡机制研究

• 作者: 向梅 孙文静 张婉婉 杨永坚 王娟 王璐璐 荣青秀 马晓丽
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: 二甲基甲酰胺 H9c2心肌细胞 细胞凋亡 NF-κB 线粒体
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 106-110
• 页数: 5页
• 字数: 4137字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2017.02.006

摘要

目的 观察二甲基甲酰胺(DMF)致H9c2心肌细胞凋亡过程中核因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白胞质p65蛋白、核内p65蛋白、磷酸化核因子-κB抑制(p-IκB)蛋白以及线粒体通路相关蛋白胞质细胞色素C(Cyt-c)、 活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)水平的变化,探讨DMF引起H9c2心肌细胞凋亡的可能机制.方法 给予体外培养的H9c2心肌细胞200 mmol/L DMF染毒,蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测染毒0、2、4、6、8、12 h后胞质p65、核内p65、p-IκB的蛋白表达水平以及染毒0、2、4、8、12、24 h后胞质Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2的蛋白表达水平,免疫荧光细胞化学(IFC)法对染毒不同时间后的细胞内Cyt-c进行定位.结果 各组胞质p65、核内p65、p-IκB蛋白表达水平组间差异均有统计学意义(F=7.79、33.11、90.25,均P<0.01);与对照组比较,2、4、6 h染毒组胞质p65蛋白表达水平均降低,2、4、6、8 h染毒组核内p65蛋白表达水平均升高,2、4、6 h染毒组p-IκB蛋白表达水平均升高,差异均有统计学意义(均P<0.01).各组胞质Cyt-c、Cleaved caspase-3、Bcl-2蛋白表达水平组间差异均有统计学意义(F=51.42、503.68、73.37,均P<0.01);与对照组比较,8、12 h染毒组Cyt-c蛋白表达水平均升高,2、4、8、12、24 h染毒组Cleaved caspase-3蛋白表达水平均升高、Bcl-2蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义(均P<0.01).IFC法对细胞内Cyt-c检测显示,随着DMF染毒时间的延长,Cyt-c逐渐从线粒体释放到胞质内.结论 NF-κB信号通路与线粒体通路可能参与了DMF诱导的H9c2心肌细胞凋亡.