密码子优化α-L-鼠李糖苷酶基因在酿酒酵母细胞的表面展示表达及产物的酶学性质

• 作者: 何姝 张凡 李文静 王俊 王方芹 罗姮
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: α-L-鼠李糖苷酶 基因密码子 酿酒酵母 表面展示 酶学性质 黄酮苷类化合物
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 638-647
• 页数: 10页
• 分类号: Q556|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2017.04.014

摘要

桑树富含黄酮苷类化合物,利用糖苷酶生物转化可有效提高其生物利用度,对挖掘桑树资源的药食用价值具有重要意义.天然来源的糖苷酶催化选择性强,但异源表达量低.以源自黑曲霉(Aspergillus niger)的α-三-鼠李糖苷酶基因rha为目的基因,改善该基因的密码子偏爱性和适应性,将密码子优化后的corha基因展示表达到酿酒酵母细胞表面,以达到高效催化的实用目的.与转入原始rha基因的重组酿酒酵母菌株相比,转入密码子优化corha基因的重组酿酒酵母菌株表面展示..RHA蛋白的表达量提高了2.9倍,培养60 h后coRHA的酶活力提高了2.7倍.以对硝基苯-β-L-鼠李糖苷(pNPR)为底物检测含corha基因重组菌株生产coRHA的酶活力,其最适pH及温度分别为5.0和45℃;以芦丁为底物,在pH 5.0、60 ℃条件下,..RHA水解芦丁合成异槲皮苷的得率为79.81％+3.1％.采用系统密码子优化策略,为利用工程茵工业化生产coRHA,用于催化桑树黄酮苷类化合物定向水解提供了可行的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王俊		60	403	12.0	19.0
2	李文静		4	13	2.0	3.0
3	张凡		3	1	1.0	1.0
4	王方芹		3	0	0.0	0.0
5	罗姮		3	6	1.0	2.0
6	何姝		1	0	0.0	0.0