MnCl2和MPP+诱导SK-N-SH细胞氧化应激及自噬的比较

• 作者: 傅娟玲 刘文丽 周宗灿 姚碧云 王裕 窦长松 赵鹏
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: 锰 1-甲基-4-苯基吡啶 自噬 氧化应激 SK-N-SH细胞
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 96-100
• 页数: 5页
• 字数: 4745字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2017.02.004

摘要

目的 研究锰和1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)引起人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞氧化应激和自噬的异同,进一步探讨锰神经毒性机制.方法 以0.0625、0.125、0.25、0.5、1.0和2.0 mmol/L MnCl2和MPP+分别处理SK-N-SH细胞24 h,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)试验检测细胞存活率;0.125、0.25、0.5 mmol/L MnCl2和MPP+分别处理细胞24 h,采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量,激光共聚焦显微镜观察细胞自噬体,蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测自噬相关蛋白P62和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达.结果 与对照组比较,0.0625~2.0 mmol/L MnCl2和0.125~2.0 mmol/L MPP+处理组SK-N-SH细胞存活率均明显降低,且0.25~2.0 mmol/L MnCl2处理组SK-N-SH细胞存活率明显低于相同剂量MPP+处理组(均P<0.05);与对照组比较,0.125~0.25 mmol/L MnCl2和0.125~0.5 mmol/L MPP+处理组SK-N-SH细胞内ROS含量均明显增加,0.25~0.5 mmol/L MPP+处理组细胞内ROS含量明显高于相同剂量MnCl2处理组(均P<0.05);与对照组比较,0.25~0.5 mmol/L MnCl2和MPP+处理组细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值均明显增加,P62表达均明显下降,且0.125~0.5 mmol/L MPP+处理组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值明显高于相同剂量MnCl2处理组,0.125和0.25 mmol/L MPP+处理组P62表达水平明显低于相同剂量MnCl2处理组(均P<0.05).结论 MnCl2和MPP+均可引起SK-N-SH细胞氧化应激,诱导自噬,且MPP+对SK-N-SH细胞自噬的诱导作用明显高于MnCl2.