以dotA基因为靶标的LAMP法快速检测嗜肺军团菌

• 作者: 林韵 肖晓臻 肖贤声 陆勇军
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 医学
• 关键词: 嗜肺军团菌 ⅣB型分泌系统 环介导等温扩增 dotA
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 743-748
• 页数: 6页
• 分类号: R378
• 字数: 4428字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13604/j.cnki.46-1064/r.2017.08.01

摘要

目的 建立一种简便、高效、特异、灵敏的快速检测军团菌肺炎致病原-嗜肺军团菌的方法.方法 本研究分析了NCBI数据库中嗜肺军团菌ⅣB型分泌系统的序列,经过筛选建立了以dotA基因为靶标的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测法.为了验证该法的特异性,提取了约旦军团菌、马氏军团菌、沙门菌、不同血清型的嗜肺军团菌基因组DNA进行检测;为了验证该法的灵敏度,对梯度浓度的阳性模板进行了检测,并与普通PCR对比;最后还将该法实际应用于环境水样的检测.结果 本法可于30 min内完成扩增;扩增产物电泳呈现LAMP特有的梯形条带,酶切产物的片段大小符合理论值;阳性产物中可见白色沉淀,加入溴乙锭后在紫外光下可见明亮的荧光,阴性产物无此现象.结论 该dotA-LAMP嗜肺军团菌检测法的特异性好,灵敏度高于普通PCR,可在简易的实验环境中快速、特异、灵敏、直观地检测出嗜肺军团菌,具备现场检测及基层推广的应用潜力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆勇军	中山大学生命科学学院	31	223	9.0	13.0
2	肖贤声		4	14	2.0	3.0
3	林韵	中山大学生命科学学院	2	3	1.0	1.0
4	肖晓臻		2	3	1.0	1.0