miRNA调控昆虫精巢干细胞自我更新相关基因的保守性分析和靶标验证

• 作者: 李飞 马行洲
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 昆虫 家蚕 小菜蛾 精巢 干细胞 自我更新 miRNA靶标 3'UTR
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 847-856
• 页数: 10页
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2017.08.001

摘要

[目的]发现昆虫精巢干细胞自我更新相关基因3'UTR上的保守miRNA靶位点,为深入研究昆虫精子发生进程中的miRNA-基因调控关系提供参考.[方法]使用Blast搜索27种全变态昆虫精巢干细胞自我更新相关基因,并预测这些基因的3'UTR.使用TargetScan预测这些基因3'UTR上的miRNA靶位点.对家蚕Bombyx mori和小菜蛾Plutella xylostella的Chinmo和Imp基因包含let-7-5p靶标点的3'UTR序列进行了克隆,使用双荧光素酶报告系统对其靶标关系进行验证.[结果]在27种全变态昆虫中发现了17个精巢干细胞自我更新相关基因.利用TargetScan在这些基因的3'UTR上预测到了203个保守的miRNA靶位点.其中Zfh-1,Chinmo,Ken及Imp的3'UTR上存在大量的miRNA靶位点,但miRNA靶位点数目在不同昆虫类群中也存在很大差异.其中,Chinmo及Imp 3 'UTR上的let-7-5p靶位点在昆虫中保守.分别克隆了家蚕和小菜蛾Chinmo和Imp的3'UTR,通过双荧光素酶报告系统转染239T细胞证实了let-7-5p对Chinmo和Imp两个基因的调控作用.[结论]发现在4个昆虫精巢干细胞自我更新相关基因Zfh-1,Chinmo,Ken和Imp的3'UTR上存在大量的miRNA靶标位点.其中Chinmo及Imp基因3'UTR上let-7-5p靶位点在大多数全变态昆虫中保守,双荧光素酶报告系统实验证实了家蚕和小菜蛾中let-7-5p与Chinmo和Imp存在相互作用,为进一步研究miRNA在昆虫精子发生进程中的功能提供了参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李飞	南京农业大学植物保护学院	60	438	12.0	20.0
5	马行洲	南京农业大学植物保护学院	1	0	0.0	0.0