凋亡抑制剂Z-VAD-FMK在猪卵母细胞冷冻保存中的应用

• 作者: 吴彩凤 张德福 张树山 戴建军 钮莹芳 陈亚宁
• 来源期刊: 上海农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: Z-VAD-FMK 细胞凋亡 玻璃化冷冻 卵母细胞 猪
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 124-129
• 页数: 6页
• 分类号: S814.8|S828
• 字数: 4233字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15955/j.issn1000-3924.2017.03.24

摘要

在猪MII期猪卵母细胞冷冻解冻后的孵育液中添加凋亡抑制剂Z-VAD-FMK,通过检测线粒体膜电位、早期凋亡、胚胎发育和相关基因表达等研究Z-VAD-FMK对冷冻后卵母细胞的影响.结果表明:(1)冷冻后线粒体膜电位(0.91)与新鲜卵母细胞(1.33)相比显著降低,添加Z-VAD-FMK显著提高了线粒体膜电位(1.19);(2)冷冻后卵母细胞的早期凋亡率(57.65％)与新鲜卵母细胞(8.37％)相比显著升高,存活率(61.45％)、孤雌激活卵裂率(13.18％)和囊胚率(3.10％)与新鲜卵母细胞(98.97％、89.41％和41.40％)相比显著下降,冻后孵育液中添加Z-VAD-FMK处理能显著降低其早期凋亡率(32.82％),并显著提高其存活、孤雌激活卵裂和囊胚的发育能力(73.21％、39.83％和10.79％);(3)冷冻后死亡受体途径和线粒体途径中促凋亡基因表达显著增加,抗凋亡基因表达显著降低,加入Z-VAD-FMK后促凋亡基因表达显著下降,抗凋亡基因表达显著增加.总之,在冻后孵育液中添加凋亡抑制剂Z-VAD-FMK能提高卵母细胞膜电位水平,降低细胞凋亡和相关基因表达,从而达到提高冻后猪卵母细胞体外发育能力的目的.