摘要:
目的 探讨早期应用血必净通过Rho激酶信号通路对脓毒症急性肾损伤后肾小管细胞凋亡的保护作用.方法 2014年8月-2015年6月,54只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组、脓毒症组、血必净组,每组18只.脓毒症组和血必净组以盲肠结扎穿孔(CLP)法制造脓毒症模型,脓毒症组大鼠CLP后0.5 h尾静脉注射0.9%氯化钠溶液4 ml/kg;血必净组大鼠CLP后0.5 h尾静脉注射血必净注射液4 ml/kg.造模后6、24 h每组分别选取9只大鼠采用激光多普勒血流仪测定血流灌注(BPU)情况,采用全自动生化仪检测血肌酐、尿素氮、肌酐清除率(CrCl),病理组织学检测评定肾小管损伤评分,采用原位末端标记(TUNEL)法计算凋亡指数(AI),Western blotting法检测Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(ROCK-1)、肌球蛋白磷酸酶靶亚基1(MYPT-1)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)的表达水平.结果 3组大鼠造模后6 h BPU及造模后24 h BPU、血肌酐、尿素氮、CrCl比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中造模后6 h,脓毒症组大鼠BPU较假手术组升高,血必净组大鼠BPU较假手术组升高、较脓毒症组降低(P<0.05);造模后24 h,脓毒症组大鼠BPU较假手术组降低,脓毒症组大鼠血肌酐、尿素氮、CrCl较假手术组升高,血必净组大鼠尿素氮、CrCl较假手术组升高,血必净组大鼠BPU较脓毒症组升高,血必净组大鼠血肌酐、尿素氮、CrCl较脓毒症组降低(P<0.05).造模后6 h,3组肾小管损伤评分、AI比较,差异无统计学意义(P>0.05);造模后24 h,3组肾小管损伤评分、AI比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中脓毒症组肾小管损伤评分、AI较假手术组升高,血必净组肾小管损伤评分、AI较假手术组升高,血必净组肾小管损伤评分、AI较脓毒症组降低(P<0.05).造模后6、24 h,3组ROCK-1、MYPT-1和Caspase-3表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中造模后6 h,脓毒症组和血必净组ROCK-1、MYPT-1和Caspase-3表达水平较假手术组升高(P<0.05);造模后24 h,脓毒症组ROCK-1、MYPT-1和Caspase-3表达水平较假手术组升高,血必净组ROCK-1、MYPT-1表达水平较假手术组升高,血必净组ROCK-1、MYPT-1和Caspase-3表达水平较脓毒症组降低(P<0.05).结论 早期应用血必净可以通过Rho激酶信号通路减少肾小管细胞在脓毒症进程中的凋亡,改善病理学改变,减轻脓毒症导致的急性肾损伤.