农杆菌介导香菇菌丝遗传转化体系的研究

• 作者: 刘建雨 姜宁 宋春艳 尚晓冬 章炉军 谭琦
• 来源期刊: 菌物学报
• 关键词: 香菇 单核体菌丝 农杆菌 潮霉素 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1514-1523
• 页数: 10页
• 字数: 6943字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13346/j.mycosystema.170041

摘要

香菇Lentinula edodes是世界第二大食药用真菌,随着其全基因组测序的完成,功能基因组学研究也逐渐展开,建立稳定的香菇转化体系是目前的研究热点.本文将探索以农杆菌为介导的遗传转化体系在香菇中进行随机插入突变的转化效率以及稳定性.构建的质粒pYN6982以潮霉素抗性基因hyg作为筛选标记基因,以增强型荧光蛋白基因egfp作为报告基因,以农杆菌EHA105和LBA4404为介导,同时转化了孢子单核体、原生质体单核体和双核体菌株.结果表明采用小米粒培养基进行菌丝培养和转化,经潮霉素抗性筛选,以及5代传代后,对转化子中的hyg和egfp基因进行PCR扩增和测序,验证了转化子的遗传稳定性.经过荧光显微观察表明,EGFP在转化子中可稳定表达.本研究探索出一种采用小米粒培养基培养菌丝并进行转化的新方法,建立了稳定的农杆菌介导的香菇遗传转化体系,为进一步开展香菇的基因功能研究奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭琦	上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心	33	624	15.0	24.0
2	宋春艳	上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心	9	155	4.0	9.0
3	姜宁	上海海洋大学食品学院	3	9	1.0	3.0
5	章炉军	上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心	4	23	2.0	4.0
8	刘建雨	上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心	1	9	1.0	1.0