鲤春病毒血症病毒核蛋白、磷蛋白与基质蛋白的表达、抗体制备及免疫原性比较

• 作者: 张海强 邵玲
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鲤 鲤春病毒血症病毒 结构蛋白 多克隆抗体 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 页码范围: 1919-1927
• 页数: 9页
• 分类号: Q785|S941.41
• 字数: 6667字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20170110679

摘要

鲤春病毒血症病毒(SVCV)能够引起鲤科鱼类大量死亡,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须申报的重要疫病,也是我国唯一被列为一类疫病的鱼类传染病.为建立SVCV的快速免疫学诊断方法,研究其主要结构蛋白间的免疫原性差异,实验首先采用原核表达系统克隆并诱导表达,纯化SVCV的核蛋白(N)、磷蛋白(P)和基质蛋白(M),并进一步免疫新西兰白兔制备抗血清,抗血清经Protein A柱进一步纯化获得3种蛋白的多克隆抗体.利用间接酶联免疫吸附测定(ELISA)和免疫印迹实验(Western blot)对抗体效价和特异性进行分析验证.结果发现,SVCV的N、P和M重组蛋白均在原核表达系统获得大量表达,且表达的蛋白经纯化后免疫实验动物产生了相应的多克隆抗体.Western blot结果显示,3种蛋白抗体均与SVCV重组蛋白及天然蛋白发生特异性的免疫反应.ELISA结果显示,针对P蛋白制备的抗体效价最高,可达409600;针对N和M蛋白制备的抗体效价也均大于204800.同时,特异性检测实验结果显示,制备的3种蛋白抗体均仅与SVCV发生特异性免疫反应,而与SVCV宿主其他易感病毒均不发生交叉反应.实验结果将对SVCV的快速诊断及疫苗开发提供新的手段和思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张海强		5	5	1.0	1.0
2	邵玲		5	19	2.0	4.0