粉尘螨变应原第2组分真核表达载体的构建及其在小鼠骨髓间充质干细胞中的表达

• 作者: 俞黎黎 卞勇华 史卫红 崔玉宝 黄思怡
• 来源期刊: 广西医学
• 学科: 医学
• 关键词: 粉尘螨 变应原 第二组分 骨髓间充质干细胞 真核表达载体 基因转染
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 372-375
• 页数: 4页
• 分类号: R384.4
• 字数: 3799字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11675/j.issn.0253-4304.2017.03.25

摘要

目的 构建含粉尘螨变应原第2组分(Der f 2)基因真核表达载体,并观察其在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达.方法 提取粉尘螨总RNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法扩增Der f 2基因,测序鉴定后将Der f 2基因克隆入pcDNA3.0质粒中,构建真核表达载体pcDNA3.0-Der f 2.将小鼠BMSCs分3组进行实验,包括pcDNA3.0-Der f 2转染组、pcDNA3.0空质粒转染组及未转染组,分别利用RT-PCR、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Der f 2基因及蛋白在3组BMSCs中的表达.结果 扩增的Der f 2基因序列与GenBank的参考序列完全一致,Der f 2基因正确克隆至真核表达载体pcDNA3.0中.转染BMSCs 48 h后,RT-PCR、Western blot检测结果显示,未转染组和pcDNA3.0空质粒转染组未检测到Der f 2基因表达,pcDNA3.0-Der f 2转染组检测到特异性条带,且大小与预期相符.结论 pcDNA3.0-Der f 2真核表达载体构建成功,Der f 2的mRNA和蛋白能在小鼠BMSCs中正确表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	史卫红	江苏省盐城卫生职业技术学院基础医学部	5	14	2.0	3.0
2	崔玉宝	江苏省盐城市第三人民医院中心实验室	3	6	2.0	2.0
3	卞勇华	江苏省盐城卫生职业技术学院基础医学部	1	1	1.0	1.0
4	俞黎黎	江苏省盐城卫生职业技术学院基础医学部	1	1	1.0	1.0
5	黄思怡	江苏省盐城卫生职业技术学院基础医学部	1	1	1.0	1.0