鸭坦布苏病毒E蛋白特异性抗原表位鉴定及Epitope-ELISA血清学诊断方法建立

• 作者: 刘明 张云 张青山 李晨曦 白小飞 邵周伍林
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭坦布苏病毒 抗原表位 交叉反应性 Epitope-ELISA
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1958-1968
• 页数: 11页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 6721字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2017.10.019

摘要

旨在建立鸭坦布苏病毒(DTMUV)的特异性血清学诊断方法.本研究以纯化的单克隆抗体1A5为固相筛选分子,利用噬菌体展示技术鉴定DTMUV囊膜(E)蛋白的特异性抗原表位,并利用DNAStar分析抗原表位序列在DTMUV中保守性和与其他黄病毒的E蛋白相应位点的氨基酸序列相似性.结果成功筛选到DTMUV E蛋白的一个线性抗原表位s7YAEYI91,该抗原表位在DTMUV中具有高度的保守性,无氨基酸位点差异,而与其他黄病毒E蛋白相应位点的氨基酸序列不具有相似性.Dot-Blotting结果表明表位87YAEYI91与DTMUV阳性血清具有良好的亲和性,而与JEV、DENV、WNV等黄病毒阳性血清间不出现交叉反应,可见抗原表位87YAEYI91为DTMUV所特有的抗原表位.利用DTMUV特异性抗原表位.7YAEYI91建立Epitope-ELISA血清学诊断方法并对126份鸭血清样品进行检测,以中和试验作为标准进行比较,结果显示Epitope-ELISA检测方法的相对特异性为100％,相对敏感度为96％,并且Epitope-ELISA与其他黄病毒血清间不出现交叉反应性,表明本研究建立的Epitope-ELISA检测方法是一种特异的、灵敏的ELISA血清学诊断方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘明	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	73	734	12.0	25.0
2	张云	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	48	409	9.0	20.0
3	白小飞	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	5	17	3.0	4.0
4	邵周伍林	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	8	27	4.0	5.0
5	李晨曦	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	9	53	3.0	7.0
6	张青山	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	3	14	2.0	3.0