芍药PlGA20ox基因的克隆及其在芽内休眠解除进程中的表达分析

• 作者: 国静 李俊杰 郭先锋 韩璐璐 马燕
• 来源期刊: 植物生理学报
• 关键词: 芍药 PlGA20ox 克隆 亚细胞定位 表达 芽
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 677-686
• 页数: 10页
• 语种: 中文

摘要

以芍药'大富贵'芽为试材,采用RT-PCR结合cDNA末端快速扩增(RACE)技术,克隆得到GA20ox基因的cDNA全长,命名为PlGA20ox(GenBank登录号为KU886552).该基因全长1351 bp,开放阅读框1146 bp,共编码381个氨基酸,含有高度保守的20G-Fe(II)-Oxy蛋白结构域、Fe2+结合位点(His-247、Asp-249和His-303)和2-酮戊二酸结合位点(Arg-313和Ser-315).PlGA20ox蛋白分子量为43209.1 Da,为稳定蛋白,无跨膜结构域,无信号肽,属于C19-GAoxs.氨基酸序列同源性及系统进化树分析表明:PlGA20ox与牡丹PsGA20ox同源性高达96%,亲缘关系最近.采用农杆菌介导法将PlGA20ox基因于本生烟叶片中瞬时表达,观察显示:PlGA20ox蛋白定位于细胞质中.该基因在芍药各器官中均有表达,其中,在芽中表达最高,其次花瓣,在根、萼片、叶片和茎中表达微弱.实时荧光定量PCR和高效液相色谱(HPLC)结果显示:在低温解除芍药芽内休眠进程中,PlGA20ox表达水平呈先上升后总体下降趋势,且与内源GA3含量呈显著正相关(r=0.901*);外施赤霉素会明显增加内源GA3含量,但同时抑制PlGA20ox的表达,说明PlGA20ox调控GA3的合成,同时受植物体内活性GA3含量的负反馈调节.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭先锋		50	493	12.0	20.0
2	马燕		29	189	7.0	13.0
3	国静		5	7	1.0	2.0
4	李俊杰		4	15	1.0	3.0
5	韩璐璐		6	15	1.0	3.0