电转法介导沉默ABCE1基因对人胆囊癌细胞基因表达及增殖能力的抑制作用

• 作者: 张琦 段巨涛
• 来源期刊: 中国中西医结合外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胆囊癌 ATP结合盒转运子E1 电转法 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 523-527
• 页数: 5页
• 分类号: R735.8
• 字数: 3750字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6948.2017.05.016

摘要

目的:研究电转法沉默ATP结合盒转运子E1(ABCE1)基因表达后对人胆囊癌GBC-SD细胞基因表达及增殖能力的抑制作用.方法:构建靶向ABCE1基因的载siRNA质粒(ABCE1-siRNA)以及阴性对照质粒(NC-siRNA),分别设置ABCE1-siRNA组、NC-siRNA组及空载组,于体外电转法转染至人胆囊癌GBC-SD细胞,形成ABCE1-GBC-SD、NC-siRNA-GBC-SD、Ctrl-GBC-SD细胞.分别采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)、蛋白印迹(Western blotting)检测电转后细胞中ABCE1基因mRNA与蛋白的表达水平,流式细胞仪检测GBC-SD细胞周期及凋亡,CCK-8法测定GBC-SD细胞的增殖能力.结果:成功构建靶向ABCE1基因的载siRNA质粒.与对照组相比,电转后ABCE1-GBC-SD细胞中ABCE1基因mRNA(0.45±0.06)和蛋白表达水平(0.65±0.10)显著降低(P<0.05);ABCE1-GBC-SD组细胞的生长速度减慢(P<0.05),细胞周期被阻滞于G0/G1期,S期的细胞数减少;与空载组相比,ABCE1-GBC-SD组细胞凋亡率(16.80±3.58)显著升高(P<0.01).结论:体外电转沉默ABCE1基因的表达后能够抑制胆囊癌细胞的基因表达及增殖能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段巨涛	天津医科大学南开临床医学院	1	1	1.0	1.0
2	张琦	天津市南开医院中西医结合急腹症研究所	5	2	1.0	1.0