血小板膜糖蛋白GPIbα末端重新糖基化的研究

• 作者: 任芙蓉 夏红英 朱家明 杨玲玲 王卓妍 石丽萍
• 来源期刊: 北京医学
• 关键词: 血小板膜糖蛋白 糖基化流式细胞术 金属蛋白酶
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 临床输血专栏
• 页码范围: 399-401,404
• 页数: 4页
• 字数: 2687字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15932/j.0253-9713.2017.04.021

摘要

目的 建立冷藏(4℃)保存48 h血小板膜糖蛋白GPIbα(CD42b)末端半乳糖基化及唾液酸化的方法.方法 冷藏保存48 h后,将半乳糖基化底物UDP-gal及唾液酸化底物CMP-NeuAc加入血小板保存袋中,37℃复温lh,分别以FITC-sWGA、FITC-ECA标记血小板膜糖蛋白GPIbα末端β-GlcNAc及β-Gal糖基,流式细胞术检测糖基化效果.以FITC-CD42 b抗体标记血小板膜糖蛋白GPIbα,流式细胞术检测冷藏保存以及糖基化处理对于GPIbα蛋白量的影响.以金属蛋白酶(metalloproteinase,MP)抑制剂GM6001抑制MP对GPIbα的剪切,验证冷藏保存以及糖基化处理对GPIbα的量的影响,并阐明其机制.结果 FITC-sWGA、FITC-ECA标记结果显示,冷藏保存48h后37℃复温1h处理(无论是否加入糖基化底物)可致膜表面GPIbα末端糖基暴露(以FITC荧光强度表示)明显降低,FITC-sWGA荧光强度由1918.2±526.2降至1316.2±368.1,FITC-ECA荧光强度由8036.6±1466.3降至5672.6±1522.7 (P＜0.05);同时可致膜表面GPIbα蛋白量降低,由1582.9±123.1降至1380.7±136.7 (P＜0.05);加入GM6001后,GPIbα蛋白量恢复至对照组水平1602.2±153.2.相对荧光强度分析显示,冷藏保存48h与冷藏保存48h后37℃复温1h处理组FITC-sWGA/CD42b比值分别为2.23±0.56与2.11±0.38,FITC-ECA/CD42b比值分别为2.02±0.36与1.91±0.33,二组之间无统计学差异.结论 冷藏保存48h后37℃复温1h处理可致血小板膜糖蛋白GPIbα量减少;减少系复温处理激活MP所致;通过此处理方式实现血小板糖蛋白GPIbα重新糖基化不可行.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏红英		2	6	1.0	2.0
2	任芙蓉		3	11	2.0	3.0
3	杨玲玲		1	0	0.0	0.0
4	石丽萍		1	0	0.0	0.0
5	王卓妍		2	5	1.0	2.0
6	朱家明		4	55	3.0	4.0