下调骨细胞TGF-β/Smad4信号可抑制小鼠BMSCs成骨及破骨分化

• 作者: 代光明 任磊 何小强 刘伟 刘文 涂小林 陈宇 陈虹 黄伟
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 骨细胞 TGF-β/Smad4 BMSCs 成骨分化 破骨分化
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 786-791
• 页数: 6页
• 分类号: R34
• 字数: 3088字
• 语种: 中文

摘要

目的检测骨细胞TGF-β/Smad4信号通路对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨和破骨分化的作用,并初步探讨其相关机制.方法用条件性基因敲减Cre/loxp技术特异性敲减骨细胞Smad4,获得下调骨细胞TGF-β/Smad4信号通路的小鼠;体外分离骨细胞并与野生型小鼠骨髓间充质细胞(BMSCs)共培养;碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红(alizarin red)染色检测早期成骨分化和晚期钙盐沉积,酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨细胞;real-time PCR检测成骨分化特异标志物Runx2、Osterix(OSX)、ALP、osteocalcin和破骨分化特异标志物RANKL和OPG 的mRNA表达水平.Western blot检测成骨分化特异标志物Runx2和osteocalcin和破骨分化特异标志物RANK蛋白表达水平.结果下调骨细胞TGF-β/Smad4信号能够抑制BMSCs成骨转录因子Runx2、Osterix(P<0.01)、成骨分化特异标志物ALP和osteocalcin(P<0.01)以及破骨分化特异标志物RANK(P<0.01)的表达;增加破骨分化抑制物OPG的表达(P<0.05);而RANKL的表达无明显变化;最终下调了RANKL/OPG的比值(P<0.05).结论终末分化的骨细胞调控骨的代谢,下调其TGF-β/Smad4信号可抑制BMSCs成骨和破骨细胞的分化.