人肺泡上皮细胞A549中细胞间粘附分子-1的siRNA构建探讨

• 作者: 张优仪 程德云 胡晓波
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞间黏附分子1 小干扰RNA 脂多糖 转染
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1498-1503
• 页数: 6页
• 分类号: R56|R392.11
• 字数: 5363字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2017.11.004

摘要

目的 构建A549细胞中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的小干扰RNA,探讨ICAM-1特异性siRNA能否抑制LPS诱导A549细胞ICAM-1的表达.方法 采用化学合成法构建A549细胞ICAM-1的小干扰RNA.LPS诱导A549细胞ICAM-1表达,用RT-PCR和流式细胞仪分别从mRNA和蛋白水平检测ICAM-1的表达.使用阳离子脂质体Lipofectamin2000转染ICAM-1siRNA到A549细胞,再用LPS刺激A549细胞,RT-PCR和流式细胞仪分别检测RNA干扰A549细胞后ICAM-1的mRNA和蛋白表达.结果 LPS可以诱导A549细胞ICAM-1的表达,但LPS浓度过大损伤细胞.10 ng/ml的LPS组和100 ng/ml的LPS组OD值相比,两组OD值之间差异有显著性(P＜0.001).10ng/ml的LPS作用A549细胞8h左右,细胞无明显损伤;10 ng/ml LPS作用A549细胞1h后,ICAM-1 mRNA的表达上调(P＜0.05),而ICAM-1蛋白水平增加不明显;10 ng/ml LPS作用A549细胞4h后,ICAM-1 mRNA表达水平明显增加(P ＜0.05),ICAM-1蛋白水平也增加明显.通过化学合成法构建ICAM1的siRNA,筛选出最优siRNA.转染ICAM-1siRNA后,LPS刺激A549细胞的ICAM-1的mRNA和蛋白表达水平增加不明显.结论 通过化学合成法构建的ICAM-1siRNA,可以有效地干扰ICAM-1的表达,ICAM-1siRNA降低了LPS诱导的ICAM-1的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程德云	四川大学华西医院呼吸科	145	869	14.0	20.0
2	胡晓波	成都市第一人民医院呼吸科	3	1	1.0	1.0
3	张优仪	四川省人民医院放射科	6	4	1.0	2.0