草菇电击法遗传转化的研究

• 作者: 于海龙 吕贝贝 吴潇 唐雪明 武国干 蒋玮 赵妍 陈蕾
• 来源期刊: 上海农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 草菇 遗传转化 电击法 潮霉素
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子遗传学
• 页码范围: 5-10
• 页数: 6页
• 分类号: S646.1
• 字数: 4860字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15955/j.issn1000-3924.2017.03.02

摘要

建立了草菇电击遗传转化体系,遗传转化的最优条件为:用1.5％溶壁酶,32℃酶解草菇48 h菌龄菌丝体3h,将20 μL 50 ng/μL质粒融入100 μL草菇酶解液中,在外加电压1000V的条件下电击;电击后的草菇菌丝体涂布于再生培养基中,32℃培养2d后在含有20 μg/mL潮霉素的培养基上进行抗性筛选,分子检测正常生长的单克隆是否为阳性克隆.