抗人OX40单克隆抗体的制备和初步鉴定

• 作者: 仇玮祎 侯小娟 孙志伟 王双 袁旭东 陈鸿斌
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: OX40 单克隆抗体 噬菌体抗体 特异性
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 242-248,376
• 页数: 8页
• 分类号: R392.1
• 字数: 5764字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2017.03.003

摘要

目的:获得全人源抗人OX40特异性抗体候选株,为相关药物开发奠定基础.方法:依托本实验室构建的大容量全合成全人源噬菌体单链抗体库平台,以OX40为抗原进行固相筛选,经过3轮条件渐进严苛的筛选后,阳性克隆得到富集;将其中富集效果最好的一株单链抗体scFv-1改造成全抗体(IgG1)形式,改造成功的重组质粒按照一定比例转染HEK293-F细胞进行抗体的瞬时表达;基于AKTA系统对全抗体进行纯化,将纯化得到的金抗体重命名为OX40mab-1.通过ELISA、间接免疫荧光、流式细胞术等试验分别验证OX40mab-1与抗原的结合活性、特异性、血清稳定性;通过BIAcore3000初步测定抗体亲和力.结果:3轮筛选后得到1株富集率达95％的单链抗体,改造成全抗体形式后,与抗原OX40的结合EC50为0.015 μmol/L;该抗体与其他无关抗原均不结合,特异性良好;37℃血清放置15 d后,与抗原依具有较好的结合活性,血清稳定性良好;经BlAcore 3000初步测定该抗体亲和力为251 nmol/L.结论:获得1株理化性质良好、特异性较好的抗OX40全人源单克隆抗体OX40mab-1,具有继续开发价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王双	军事医学科学院生物工程研究所	31	134	5.0	11.0
2	孙志伟	军事医学科学院生物工程研究所	68	390	10.0	16.0
3	仇玮祎	军事医学科学院生物工程研究所	8	28	3.0	5.0
4	侯小娟	军事医学科学院生物工程研究所	1	0	0.0	0.0
5	陈鸿斌	军事医学科学院生物工程研究所	1	0	0.0	0.0
6	袁旭东		1	0	0.0	0.0