肠道病毒71型VP3结构蛋白的原核表达

• 作者: 张莹莹 朱冰 王长兵 肖密丝 许甜甜 郭敏
• 来源期刊: 广州医药
• 关键词: 肠道病毒71型 VP3蛋白 原核表达 pET28a
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 38-41
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8535.2017.04.009

摘要

目的 利用大肠杆菌原核表达系统优化表达纯化肠道病毒71型(EV71)VP3结构蛋白,为后续单克隆抗体制备及检测试剂盒研发提供前期基础.方法 采用PCR方法扩增EV71病毒VP3基因,将其插入表达载体pET28a(+),构建pET28a-VP3重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,分别在25 ℃、37 ℃下经IPTG诱导表达,重组表达的蛋白产物经凝胶电泳初步分析,比较不同温度诱导表达的蛋白产物.结果 成功构建pET28a-VP3重组质粒,不同温度下诱导表达的蛋白产物在30.5 kDa左右位置均出现目的条带;37 ℃下诱导表达的蛋白超声破碎并离心后,目的蛋白基本位于沉淀中,而25 ℃诱导表达的蛋白产物有少量目的蛋白溶解于上清液中. 结论 在25 ℃或37 ℃下均能利用大肠杆菌原核表达系统有效表达EV71病毒VP3蛋白;37 ℃诱导时蛋白可融性表达低,目的蛋白获取效率较高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱冰	广州市妇女儿童医疗中心中心实验室	32	317	9.0	16.0
2	张莹莹	广州市妇女儿童医疗中心中心实验室	6	65	3.0	6.0
3	王长兵	广州市妇女儿童医疗中心中心实验室	3	5	2.0	2.0
4	肖密丝	广州市妇女儿童医疗中心中心实验室	10	104	5.0	10.0
5	郭敏	广州市妇女儿童医疗中心中心实验室	7	46	4.0	6.0
6	许甜甜	广州市妇女儿童医疗中心中心实验室	2	7	2.0	2.0