简易型同源重组载体pAmpR-NeoR的构建和效果检测

• 作者: 付育 刘畅 曹晴晴 杜朝 王巧兰 王晨晨 王英泽
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因编辑 同源重组载体 同尾酶
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 页码范围: 25-30
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 5077字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2017.06.004

摘要

为了构建能够灵活用于CRISPR/Cas9系统进行基因编辑的供体质粒,利用pcDNA3.1(+)-HA-His为模板,分别扩增了其AmpR-ori片段和NeoR片段,然后连接,构建了一个简易型同源重组载体pAmpR-NeoR.载体的正选择标记NeoR基因两侧分别引入了BamHⅠ和XhoⅠ作为克隆位点,用于左、右同源臂的克隆.利用这一载体,构建了针对小鼠FasL基因的供体质粒.结果显示靶序列发生基因编辑.pAmpR-NeoR以同尾酶作为多克隆位点,这使其具有良好的扩展性、灵活性和序列通用性,便于根据需要进一步改造,以满足具体试验的不同需求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘畅	河北科技大学生物科学与工程学院	32	136	8.0	11.0
2	王英泽	河北科技大学生物科学与工程学院	14	60	4.0	7.0
3	王巧兰	河北科技大学生物科学与工程学院	2	1	1.0	1.0
4	曹晴晴	河北科技大学生物科学与工程学院	3	3	1.0	1.0
5	付育	河北科技大学生物科学与工程学院	5	2	1.0	1.0
6	王晨晨	河北科技大学生物科学与工程学院	2	2	1.0	1.0