微小RNA-135b调控Smad5在糖尿病肾病发病中的作用研究

• 作者: 何凤 傅君舟 关昌杰 刘日光 周姗姗 陈浩雄 黄俊
• 来源期刊: 新医学
• 关键词: 微小核糖核酸-135b 糖尿病肾病 Smad5 肾脏纤维化
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 317-322
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9802.2017.05.007

摘要

目的 探讨微小RNA-135b(miR-135b)在糖尿病肾病(DN)发病中的作用及可能机制. 方法 应用荧光定量PCR及原位杂交检测miR-135b在DN肾组织中的表达.采用生物信息学预测miR-135b的靶基因,并通过蛋白免疫印迹法及检测双荧光素酶报告基因活性进行验证.同时行蛋白免疫印迹法检测DN系膜细胞增殖及系膜基质相关标志蛋白的表达.结果 实时定量PCR显示,miR-135b在DN肾组织中表达较正常肾组织升高(P<0.05).原位杂交显示,miR-135b在DN肾组织中表达较正常肾组织增强,且其表达主要位于肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞的胞浆和胞核中.人肾小管上皮细胞HMC及人系膜细胞HK-2在高糖培养24 h时均能上调miR-135b的表达,48 h升高更显著,与同时点正常对照培养的HMC及HK-2比较差异均有统计学意义(P均<0.05).人源和鼠源的Smad5 3`-非翻译区与miR-135b种子序列的8个碱基UUUCGGUA完全互补.miR-135b 模拟物可下调Smad5的蛋白表达水平,而miR-135b 抑制物对Smad5的蛋白表达无影响.将Smad5 3`-非翻译区野生型和突变型质粒分别转染入HMC及HK-2,并同时转染miR-135b模拟物,发现miR-135b 模拟物能抑制Smad5 3`-非翻译区野生型荧光素酶活性,但对Smad5 3`-非翻译区突变体的荧光素酶活性无影响.miR-135b促进系膜细胞增殖及系膜基质增加 HMC细胞转染miR-135b模拟物,可有效下调其靶蛋白Smad5的表达,同时上调增殖核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白(Cyclin D1)表达,且使细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制蛋白p21表达降低(P均<0.05),但转染miR-135b抑制物对PCNA、Cyclin D1、p21的表达无影响(P均>0.05).结论 MiR-135b通过调控Smad5基因促进系膜细胞增殖及肾脏纤维化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	傅君舟	广州市第一人民医院肾内科	73	613	12.0	20.0
2	刘日光	广州市第一人民医院肾内科	33	224	10.0	13.0
3	黄俊	广州市第一人民医院肾内科	9	58	6.0	7.0
4	周姗姗	广州市第一人民医院肾内科	10	70	7.0	8.0
5	关昌杰	广州市第一人民医院肾内科	5	39	4.0	5.0
6	陈浩雄	广州市第一人民医院肾内科	13	63	5.0	7.0
7	何凤	广州市第一人民医院肾内科	3	19	3.0	3.0