氯喹对体外活化肝星状细胞自噬与胶原代谢的影响

• 作者: 吴梦瑶 尹凤荣 张晓岚 罗雨欣 郭金波 霍晓霞
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 自噬 氯喹 肝星状细胞 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 基质金属蛋白酶 金属蛋白酶组织抑制物
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1648-1653
• 页数: 6页
• 分类号: R575.2|R965
• 字数: 4505字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2017.09.019

摘要

目的:研究不同浓度的自噬抑制剂氯喹(CQ)对活化的大鼠肝星状细胞系HSC-T6中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响及可能机制.方法:应用转化生长因子β1(TGF-β1)活化HSC-T6细胞,给予CQ干预24 h.实验分组为:control组、TGF-β1组、TGF-β1+ CQ(15 μmol/L)组、TGF-β1+ CQ(30μmol/L)组和TGF-β1+ CQ(60 μmol/L)组.采用Western blot技术检测微管相关蛋白轻链3(LC3)比值LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、自噬靶蛋白P62、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶13(MMP-13)、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)和TIMP-2的表达情况;免疫细胞化学检测Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达;RT-qPCR检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-13、TIMP-1和TIMP-2mRNA的表达变化.结果:CQ干预后LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显升高且呈剂量依赖性;P62蛋白表达TGF-β1+ CQ组均显著高于TGF-β1组(P＜0.01).TGF-β1组的Ⅰ、Ⅲ型胶原表达量较control组显著增加,TGF-β1+CQ组较TGF-β1组也有明显增加.α.-SMA的表达在TGF-β1组和TGF-β1+ CQ组均显著高于control组(P＜0.05),而TGF-β1组和TGF-β1+ CQ各组之间无显著差异.MMP-13表达在TGF-β1+CQ组较TGF-β1组显著下降(P＜0.05);TIMP-1和TIMP-2在TGF-β1+ CQ组较TGF-β1组显著升高(P＜0.05),且呈剂量依赖性.结论:自噬抑制剂CQ能显著增加HSC-T6细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达并呈剂量依赖性,这可能与其上调TIMP-1及TIMP-2的表达并抑制MMP-13表达有关.