淋巴细胞特有重组激活基因蛋白载体构建及功能鉴定

• 作者: 季延红 张华 李琛 赵小惠 郑铭喆
• 来源期刊: 转化医学电子杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 载体优化 重组激活基因蛋白 P2A序列 绿色荧光蛋白(GFP)
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 21-25
• 页数: 5页
• 分类号: R392.9
• 字数: 4878字
• 语种: 中文

摘要

目的:淋巴细胞特异性重组激活基因(RAG)蛋白1和2共同组成的RAG重组酶是造成淋巴细胞发育及产生抗体多样性的关键性蛋白.本研究构建并优化同时表达RAG1和RAG2的慢病毒载体,为研究RAG1和RAG2的结构和功能奠定基础.方法:构建同时表达RAG1、RAG2和绿色荧光蛋白(GFP)的载体;Western Blotting验证该载体RAG1和RAG2蛋白表达;体外重组实验证实该载体表达的RAG蛋白具有催化断裂DNA的功能.结果:构建了表达RAG重组酶的载体pWPI-RAG2-P2A-RAG1-IRES-GFP;Western Blotting验证了该载体表达RAG1和RAG2蛋白,并显示该载体RAG1和RAG2蛋白的表达量具有较高的一致性.体外重组实验证实该载体表达的RAG1和RAG2组成的重组酶具有更好的催化断裂DNA的活性.结论:优化后的pWPI-RAG2-P2A-RAG1-IRES-GFP载体可以保证RAG1和RAG2同时有效表达,GFP可作为荧光标记,为后续细胞以及动物实验奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张华	西安交通大学医学部基础医学院病原生物学和免疫学系	44	316	10.0	16.0
2	李琛	西安交通大学医学部基础医学院病原生物学和免疫学系	36	146	7.0	11.0
3	赵小惠	西安交通大学医学部基础医学院病原生物学和免疫学系	18	561	9.0	18.0
4	郑铭喆	西安交通大学医学部基础医学院病原生物学和免疫学系	2	0	0.0	0.0
5	季延红	西安交通大学医学部基础医学院病原生物学和免疫学系	8	13	2.0	3.0