黄颡鱼甘露糖受体基因的克隆和功能分析

• 作者: 兰江风 刘小玲 林蠡 樊启学 王虹
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄颡鱼 甘露糖受体 鲖爱德华菌 超氧阴离子 一氧化氮
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 页码范围: 1036-1043
• 页数: 8页
• 分类号: Q785|S965
• 字数: 5323字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20160410350

摘要

甘露糖受体(MR)隶属凝集素超家族,主要表达于巨噬细胞和未成熟的树突状细胞表面.MR不仅在先天免疫防御中发挥重要作用,还通过参与抗原呈递,激活T淋巴细胞,启动获得性免疫应答过程.本研究采用同源克隆技术获得黄颡鱼甘露糖受体(pfMR)基因,采用荧光定量PCR技术检测MR在正常黄颡鱼体内的分布情况,采用鲖爱德华菌感染黄颡鱼头肾巨噬细胞和甘露聚糖封闭MR方法研究黄颡鱼MR在抗细菌感染中的作用.结果显示,pfMR同团头鲂、草鱼、斑马鱼和尼罗罗非鱼的MR聚为一支.pfMR在所检测的12个组织中均有分布,其在肾脏、脾脏和肌肉组织中表达量较高,在血液中表达量较少.鲖爱德华菌感染黄颡鱼头肾巨噬细胞后,pfMR、IL-1β和TNF-a均被细菌诱导表达,超氧阴离子和一氧化氮的含量也上升,超氧阴离子在感染30 min后即显著上升,一氧化氮在感染12 h后才显著上升.甘露聚糖竞争结合MR,显著抑制巨噬细胞内化GFP标签的鲖爱德华菌,加入EDTA减少内化的荧光强度,加入Ca2+使内化的荧光强度回升.研究表明,黄颡鱼头肾巨噬细胞MR参与鲖爱德华菌的识别和内吞过程,而且依赖Ca2+.