凝胶过滤/离子交换全二维液相色谱系统的构建与评价

• 作者: 唐涛 孙元社 张政 张维冰 李彤 杨三东
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 全二维液相色谱 凝胶过滤色谱 离子交换色谱 强阴离子交换 强阳离子交换 蛋白质 酵母
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 526-532
• 页数: 7页
• 分类号: O658
• 字数: 5908字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2016.12006

摘要

基于蛋白质的尺寸及带电性质,将凝胶过滤色谱(GFC)与离子交换色谱(IEC)两种分离模式结合,采用双捕集柱接口构建了GFC/2×IEC二维液相色谱(2-D LC)分离系统,同时考虑离子交换色谱分离蛋白质对等电点范围的限制,进一步结合中心切割平行柱的方法实现对蛋白质的全二维分离.为与后续蛋白质在线酶解、多肽分离及质谱鉴定匹配,系统中采用常规柱以保证蛋白质质谱鉴定对样品量的要求,3种常规分离柱分别选用凝胶过滤色谱柱TSK-GEL G3000SWXL(300 mm×7.8 mm, 5 μm)、强阴离子交换色谱柱Hypersil SAX(100 mm×4.6 mm, 10 μm)和强阳离子交换色谱柱Hypersil SCX(100 mm×4.6 mm, 10 μm).最终以酵母细胞蛋白质提取液为样品,对构建的二维系统加以评价,在总蛋白质浓度13.5 mg/mL、上样体积100 μL的条件下,将第一维分离等时间切割17次,并将切割馏分全部导入第二维继续分离,二维系统在148 min内获得的总峰容量达到884.说明所构建的系统可以用于蛋白质的在线全二维分离.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐涛		37	159	7.0	10.0
2	李彤		70	374	10.0	14.0
3	孙元社		14	66	5.0	7.0
4	张政	齐齐哈尔大学化学与化学工程学院	2	4	1.0	2.0
8	杨三东		1	4	1.0	1.0