突变酶Y93S对嗜热地衣芽孢杆菌SR01葡聚糖酶热稳定性的影响

• 作者: 伍时华 易弋 梁建荣 石征宇 韦阳道 黎娅
• 来源期刊: 中国酿造
• 学科: 生物学
• 关键词: 分子动力学 嗜热地衣芽孢杆菌 葡聚糖酶 热稳定性
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 109-114
• 页数: 6页
• 分类号: Q93-33
• 字数: 5190字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11882/j.issn.0254-5071.2017.03.023

摘要

为提高嗜热地衣芽孢杆菌SR01葡聚糖酶的热稳定性,对其相关的氨基酸残基进行定点突变改造.通过对其结构的分析,构建了Y93S突变体,利用分子动力学模拟分析评估后,发现Y93S突变体可能具有较高的耐热能力,利用定点突变技术构建Y93S表达载体并分析温度对表达产物酶活的影响.试验结果表明,突变酶Y93S的最适温度由野生型酶的55℃提高至70℃;在90℃条件下,突变酶Y93S较野生型酶的半衰期由60 min提高到120 min以上;pH及pH稳定性较野生型变化不明显.突变酶Y93S极大的提高了野生型酶的热稳定性,具有潜在的工业应用价值,同时为葡聚糖酶的耐热机理提供有力依据.