Tat-LK15介导siRNA干扰大鼠脊髓背角nNOS表达对神经病理性疼痛的治疗作用

• 作者: 吴昊澎 屠伟峰 彭捷 杨秀环 陆建华 饶云
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Tat-LK15 RNA,小分子干扰 神经元型一氧化氮合酶 神经病理性疼痛 基因治疗
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 686-691
• 页数: 6页
• 分类号: R441.1
• 字数: 5251字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2017.08.05

摘要

目的 探讨细胞穿透肽Tat-LK15介导siRNA干扰大鼠脊髓背角神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达对神经病理性疼痛的治疗效应.方法 采用Tat-LK15介导FAM-siRNA转染原代大鼠脊髓背角神经元细胞(RN-dsc),于倒置荧光显微镜观察其转染效果.健康雄性SD大鼠50只,随机分为5组(n=10):正常组、假手术组、神经病理性疼痛组(SNL组)、Tat-LK15-nNOS siRNA组(TS组)和Tat-LK15-NC siRNA组(TN组).采用脊神经结扎法(SNL)制作神经病理性疼痛模型,正常组不予任何处理,假手术组仅暴露脊神经;SNL组、TS组、TN组构建SNL模型同时鞘内置管,于第7天开始每天分别鞘内注射10μl生理盐水、10μl含5μg siRNA的Tat-LK15-nNOS siRNA和Tat-LK15-NCsiRNA,持续7d.建模前1d及建模后3、7、10、14d测定各组大鼠机械缩足反应阈值(PWMT)及热缩足反应潜伏期(PWTL).第14天测定结束后取L4-6节段脊髓,采用q-PCR及Western blotting检测脊髓背角nNOS表达水平.结果 倒置荧光显微镜观察显示,Tat-LK15可成功介导siRNA转染原代大鼠脊髓背角神经元.与假手术组比较,SNL组建模后第3天起PWMT降低、PWTL缩短,脊髓背角nNOS mRNA及蛋白表达上调(P<0.01),正常组上述指标与假手术组比较差异无统计学意义;与SNL组比较,TS组第10、14天时PWMT增高、PWTL延长,脊髓背角nNOS mRNA及蛋白表达降低(P<0.01),TN组上述指标与SNL组比较差异无统计学意义.结论 Tat-LK15可成功介导nNOS siRNA转染脊髓背角神经元,沉默nNOS基因的过度表达,对SNL大鼠神经病理性疼痛具有一定的治疗作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭捷	广州广州军区广州总医院麻醉科	1	2	1.0	1.0
2	陆建华	广州广州军区广州总医院麻醉科	1	2	1.0	1.0
3	吴昊澎	广州广州军区广州总医院麻醉科	1	2	1.0	1.0
4	杨秀环	广州广州军区广州总医院麻醉科	1	2	1.0	1.0
5	屠伟峰	广州广州军区广州总医院麻醉科	1	2	1.0	1.0