天祝白牦牛HSP60基因的克隆及其在下丘脑-垂体-睾丸中的表达定位研究

• 作者: 张勇 王相生 胡俊杰 赵兴绪 阮崇美 马友记
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: HSP60基因 天祝白牦牛 RACE 生物信息学 下丘脑-垂体-睾丸轴
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 1290-1298
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2017.07.1290

摘要

热休克蛋白60(HSP60)不仅在细胞保护方面发挥作用,也参与雄性动物生殖生理的调控.为研究HSP60基因序列特性及其在天祝白牦牛下丘脑-垂体-睾丸轴(HPT-axis)上的表达情况,探寻其在白牦牛睾丸发育、精子发生过程中的作用机制,本研究采用RT-PCR和RACE技术获得白牦牛HSP60基因全长cDNA序列,采用生物信息学方法分析HSP60蛋白的理化性质、结构及不同物种之间的同源性等,并利用qPCR、Western blotting、免疫组化法分析HSP60在白牦牛下丘脑-垂体-睾丸轴中的表达及定位.结果表明,白牦牛HSP60基因cDNA全长为2 300 bp,开放阅读框为1 722 bp,编码572个氨基酸;其理论分子量为60.977kDa、等电点为5.69,编码的蛋白为非跨膜可溶性蛋白.氨基酸序列比对结果显示,白牦牛HSP60氨基酸序列与牛、瘤牛、绵羊、藏羚羊、骆驼、白犀牛、兔和黑猩猩的氨基酸序列同源性高、进化水平相近.HSP60基因及蛋白在白牦牛的下丘脑、垂体及睾丸组织中均有表达,其中下丘脑及垂体组织表达量显著高于睾丸,下丘脑和垂体之间差异不显著.免疫组化结果显示,HSP60蛋白定位表达于白牦牛下丘脑组织的室旁核大细胞、室旁核小细胞和神经角演网、垂体组织的腺细胞、睾丸组织的精原细胞、精母细胞、支持细胞和间质细胞,而精子细胞中表达较弱.通过对健康成年白牦牛HSP60在下丘脑-垂体-睾丸轴的表达与定位检测,推断HSP60参与雄性白牦牛生殖轴调控,并参与睾丸发育与精子发生.本研究结果为进一步研究HSP60对雄性生殖调控奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵兴绪	甘肃农业大学动物医学院	178	766	13.0	19.0
2	张勇	甘肃农业大学动物医学院	147	410	9.0	11.0
3	马友记	甘肃农业大学动物科技学院	83	410	11.0	17.0
4	胡俊杰	甘肃农业大学动物医学院	34	84	5.0	7.0
5	阮崇美	甘肃农业大学动物医学院	5	16	3.0	4.0
6	王相生	甘肃农业大学动物医学院	4	13	2.0	3.0