孕酮减轻ATP诱导的SH-SY5Y细胞损伤

• 作者: 宋景贵 张利彬 李东亮 李新娟 李秀娟 李超堃 沈慧 王国红 王璐 赵红岗 魏林郁
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 孕酮 腺苷三磷酸 嘌呤能P2X7受体 SH-SY5Y细胞
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1587-1592
• 页数: 6页
• 分类号: R741|R363
• 字数: 5020字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2017.09.008

摘要

目的:探讨孕酮对抗腺苷三磷酸(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用和机制.方法:取对数生长期的SH-SY5Y细胞按照孕酮或ATP浓度的不同进行分组,CCK-8法检测细胞存活率,YO-PRO-1染色检测细胞膜通透性,Fluo-3染色检测细胞内Ca2浓度的变化,Western blot法检测嘌呤能P2X7受体表达的变化.结果:与对照组相比,不同浓度(1、3、5和7 mmol/L) ATP作用2h,SH-SY5Y细胞存活率显著降低(P＜0.05),细胞摄入YO-PRO-1的荧光强度明显增加(P＜0.05),且呈剂量依赖性.浓度为3、10和30 nmoL/L的孕酮预孵育30 min可减轻ATP损伤作用,细胞存活率较单纯ATP组明显升高(P＜0.05或P＜0.01).孕酮(30nmoL/L)或P2X7受体拮抗剂KN-62 (500 nmol/L)预孵育30 min均可显著抑制ATP诱导的胞内YO-PRO-1的荧光增强(P＜0.01),而孕酮和KN-62两者之间没有明显差异.正常组细胞内钙离子含量少,ATP组细胞内钙离子荧光强度较对照组明显增高(P＜0.05),孕酮(30 nmoL/L)或KN-62 (500 nmol/L)预孵育30 min可明显降低(P＜0.05)ATP诱导的胞内钙荧光增强,而孕酮和KN-62两者之间的作用无明显差异.ATP组SH-SY5Y细胞P2X7受体表达较对照组明显增加(P＜0.05),而孕酮(30 nmol/L)预孵育30 min则可显著降低ATP诱导的P2X7受体表达(P＜0.05).结论:孕酮可抑制ATP诱导的P2X7受体表达、膜孔形成和胞内Ca2升高,降低细胞死亡率,明显减轻高浓度ATP对SH-SY5Y细胞的损伤作用.