31-去甲氧基-他克莫司的突变生物合成

• 作者: 严凌斌 吴声栋 方志锴 江红 连云阳
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: 突变生物合成 他克莫司 fkbO 框内缺失
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 遗传育种与生物合成
• 页码范围: 652-657
• 页数: 6页
• 分类号: R978.1|Q93
• 语种: 中文

摘要

目的 通过突变生物合成获得311去甲氧基1他克莫司.方法 针对大环内酯类免疫抑制剂他克莫司的聚酮链起始底物4,51二羟基111烯1环己酸(DHCHC)合成酶fkbO基因,构建基因敲除载体pFIM412-fkbO并对他克莫司产生菌Streptomyces sp.FCZ-0311 fkbO基因进行框内缺失.结果 获得突变株fStreptomyces sp.OD 14-1,经摇瓶发酵和产物HPLC分析,该突变株完全丧失了合成他克莫司的能力.在OD14-1摇瓶发酵36h后添加DHCHC类似物反式-4-羟基环己烷羧酸,发酵6d后经HPLC-MS检测发现分子量为773的他克莫司衍生物31-去甲氧基1他克莫司.结论 构建了可用于他克莫司突变生物合成的基因工程菌Streptomyces sp.OD14-1,并通过外源物质的添加获得31-去甲氧基-他克莫司.