诺如病毒衣壳蛋白在Tn5细胞中的表达及纯化

• 作者: 代云见 刘兰军 张勇侠 张雪梅 李玫颖 范凤鸣 蔡峰 赵云 马玉晓
• 来源期刊: 四川大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 诺如病毒 病毒样颗粒 昆虫细胞 杆状病毒表达系统
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 670-674
• 页数: 5页
• 分类号: Q81
• 字数: 4056字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0490-6756.2017.03.041

摘要

将人诺如病毒VA387株ORF2基因插入载体pFastBac1中,转化DH10Bac感受态细胞获得Bacmid-NoV-ORF2;脂质体介导转染sf9昆虫细胞,获得表达NoV-ORF2的重组杆状病毒Ac-NoV-ORF2.冻融破碎经Ac-NoV-ORF2感染的Tn5细胞,离心收集上清进行分子筛纯化.10％ SDS-PAGE分析结果显示,重组病毒感染的Tn5细胞可见特异的蛋白条带;目的蛋白条带为相对分子质量59 kD和56 kD的两个条带;电镜观察发现表达的诺如病毒衣壳蛋白成功装配成了大小约为40～50 nm的VLPs.结果表明在Tn5细胞中实现了诺如病毒衣壳蛋白的表达和VLPs的装配.