山羊KLF13基因的克隆及表达分析

• 作者: 俄木曲者 朱江江 李倩 林亚秋 林森 熊朝瑞 王永
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 KLF13 克隆 基因表达 前体脂肪细胞
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 102-109
• 分类号: S827
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2017.01.012

摘要

Krüppel样因子(Krüppel-like factors,KLFs)是一组与真核基因转录调控密切相关的锌指蛋白.本研究旨在克隆山羊(Capra hircus) KLF13基因的CDS区序列,检测其在山羊不同组织中表达水平,并鉴定在细胞分化过程中的表达规律.随机选取24月龄的健康简州大耳羊公羊4只,屠宰后分别采集心、肝、脾、肺、肾、皮下脂肪、背最长肌、股二头肌和臂三头肌组织样品,提取组织总RNA,利用RT-PCR法克隆山羊KLF13基因序列,并进行生物信息学分析;利用实时定量PCR法检测KLF13 mRNA的表达水平,并检测前体脂肪细胞(0、3、5、7 d)和成肌细胞(0、2、3、4、5 d)诱导分化后的KLF13 mRNA表达水平.结果显示,克隆得到KLF13 cDNA序列长991 bp (GenBank登陆号:KU041755),其中包含CDS区876 bp,5'UTR序列12 bp,3'UTR序列103bp,编码292个氨基酸残基.山羊KLF13基因编码的氨基酸序列与绵羊(Ovis aries)、牛(Bos taurus)、猪(Sus scrofa)、小鼠(Mus musculus)的相似性分别为100％、97.9％、96.6％和90.8％.山羊KLF13基因与绵羊具有最近的亲缘关系,其次为牛、人(Homo sapiens)、猪和小鼠.KLF13 mRNA在山羊脾和肺中具有最高的表达水平,而在肌肉中的表达丰度较低.在前体脂肪细胞的分化过程中KLF13mRNA表达水平逐渐降低,而在成肌细胞分化过程中则逐渐上升(除5d外).结果提示,KLF13基因可能在调控山羊前体脂肪细胞分化过程中具有重要作用.本实验为研究KLF13基因在山羊前体脂肪细胞分化中的作用提供了基础资料.